Автор работы: Пользователь скрыл имя, 25 Ноября 2012 в 16:54, курсовая работа
В теоретической части работе рассмотрены биологические особенности и характеристика бактерий различных родов аэробных азотфиксирующих микроорганизмов. Рассмотрены химизм биологической азотфиксации, основные роды бактерий – азотфиксаторов, их значение в сельском хозяйстве, влияние факторов внешней среды на размер азотонакопления в почве свободноживущими азотфиксаторами. В практической части представлены результаты опыта по учету численности микроорганизмов в тепличном грунте.
Введение…………………………………………………………………………..……….4
I. Теоретическая часть
1. Биологические особенности и характеристика 
бактерий различных  родов аэробных азотфиксирующих бактерий………………………………………….……………………………………..6
2. Роль свободноживущих азотфиксаторов
 в обогащении почвы  азотом……………………...........……………………………10
3. Оптимальные факторы  среды для развития 
аэробных азотфиксирующих  бактерий………………………….………………….12
4. Влияние корневых  выделений растений, 
органических удобрений, соломы, на активность фиксации 
азота азотобактером  и размеры азотонакопления в  почве……………….………..14
II. Практическая часть
1 Объект и методы  исследования
1.1. Характеристика взятого  образца почвы……………………………...……..17
1.2. Методы биологического исследования  почвы…………………….……….17
1.2.1.Отбор средней почвенной  пробы для 
микробиологического анализа  и требования к ней………………..………….18
1.2.2. Определение влажности  почвы…………………………………...……..18
1.2.3.Учет численности  микроорганизмов почвы……………………………..18
1.2.4.Приготовление почвенной  суспензии и 
посев на питательные  среды……………………………………………………19
2.Результаты опыта.  Учет численности микроорганизмов 
различных групп……………………………………………………………………..20
Заключение……………………………………………………………………………...34
Список используемой литературы…………………………………….………….….35
                              
Увеличение: х1600
Фото 1. Среда МПА (Bacillus sp.)
Фото 2 и 3. Среда МПА (Bacillus sp.) 4-ое разведение
Фото 4 и 5. Среда МПА (Bacillus sp.) 5-ое разведение
 
Качественная и количественная оценка
микроорганизмов на СА
| 
 Разведе- ние | 
 Общее количество колоний | Количество микроорганизмов в 1 г абсолютно сухой почвы (КОЕ/г) | Количество колоний доминирующих Микроорганизмов (Penicillum sp.) | Доминирующие формы микроорганизмов на 1 г (КОЕ/г) | Доля доминирующих форм в общей численности | 
| 10-2 | 93 | 17547 | 52 | 9811 | 55,91% | 
| 10-3 | 84 | 158490 | 44 | 83019 | 52,38% | 
Количество микроорганизмов в 1г абсолютно сухой почвы:
1)Общее кол-во 
2)Общее кол-во 
Количество 
микроорганизмов доминирующей формы                         
1)Общ. кол-во доминирующих микр. во 2 разв. = 52×102/0,53 = 9811
2)Общ. кол-во доминирующих микр. в 3 разв. = 44×103/0,53 = 83019
Доля доминирующих форм в общей численности микроорганизмов:
1)Доля домин.форм во 2 разв. = 9811/17547×100% = 55,91%
2)Доля домин.форм в 3 разв. = 83019/158490×100% = 52,38%
Признаки доминирующих микроорганизмов:
| 
 Культуральные | 
 Морфологические | 
| 1. Форма колонии – округлая 2. Размер – 0,4-0,6 см 3. Цвет – серо-зеленый 4. Блеск – мучнистый 5. Поверхность – шероховатая 6.  Структура – неоднородная       | 1.Форма клетки – цепочки конидий 2. Характер расположения клеток – цепочка 3. Способность клеток к спорообразованию - спорообразующие | 
                              
                              
Фото 6. Среда CА (Penicillum sp.)
Фото 7 и 8. Среда СА (Penicillum sp.)
2-ое разведение
Фото 9 и 10. Среда СА (Penicillum sp.) 3-е разведение
Качественная и количественная оценка
микроорганизмов на КПА
(на данной среде были обнаружены актиномицеты и бациллы)
| 
 Разведе- ние | 
 Общее количество колоний | Количество микроорганизмов в 1 г абсолютно сухой почвы (КОЕ/г) | Количество колоний доминирующих Микроорганизмов (Streptomyces sp.) | Доминирующие формы микроорганизмов на 1 г (КОЕ/г) | Доля доминирующих форм в общей численности | 
| 10-3 | 25 | 47170 | 17 | 32075 | 68,00 | 
| 10-4 | 12 | 226415 | 8 | 150943 | 66,67 | 
Количество микроорганизмов в 1г абсолютно сухой почвы:
1)Общее кол-во 
2)Общее кол-во 
Количество микроорганизмов доминирующей формы
в 1г абсолютно сухой почвы:
1)Общ. кол-во доминирующих микр. в 3 разв. = 17×103/0,53 = 32075
2)Общ. кол-во доминирующих микр. в 4 разв. = 8×104/0,53 = 150943
Доля доминирующих 
форм в общей численности 
1)Доля домин.форм. в 3 разв. = 32075/47170×100% = 68,00 %
2)Доля домин.форм. в 4 разв. = 150943/226415×100% = 66,67 %
Признаки доминирующих микроорганизмов:
| 
 Культуральные | 
 Морфологические | 
| 1. Форма колонии – округлая 2. Размер – 0,3-0,4 см 3. Цвет – серый 4. Блеск – мучнистый 5. Поверхность – шероховатая 6.  Структура – неоднородная       | 1.Форма клетки – ветвящиеся палочки и кокки 2. Характер расположения клеток – хаотично 3. Видны разветвленные гифы | 
Рис. 3 Streptomyces sp.
Увеличение: х1600
Фото 11. Среда для актиномицетов (
Фото 12 и 13. Среда для актиномицетов (Streptomyces sp.)
3-е разведение
Фото 14 и 15. Среда для актиномицетов (Streptomyces sp.)
4-е разведение
Качественная и количественная оценка
микроорганизмов на среде Гетчинсона
(на данной среде 
были обнаружены 
| 
 Разведе- ние | 
 Общее количество колоний | Количество микроорганизмов в 1 г абсолютно сухой почвы (КОЕ/г) | Количество колоний доминирующих Микроорганизмов (Trichoderma sp.) | Доминирующие формы микроорганизмов на 1 г (КОЕ/г) | Доля доминирующих форм в общей численности | 
| 10-2 | 300 | 56604 | 179 | 33774 | 59,67 | 
| 10-3 | 160 | 301887 | 145 | 273585 | 90,62 | 
Количество микроорганизмов в 1г абсолютно сухой почвы:
1)Общее кол-во 
2)Общее кол-во 
Количество 
микроорганизмов доминирующей формы                         
1)Общ. кол-во доминирующих микр. во 2 разв. = 179×102/0,53 = 33774
2)Общ. кол-во доминирующих микр. в 3 разв. = 145×103/0,53 = 273585
Доля доминирующих 
форм в общей численности 
1)Доля домин.форм. во 2 разв. = 33774/56604×100% = 59,67 %
2)Доля домин.форм. в 3 разв. = 273585/301887×100% = 90,62 %
Признаки доминирующих микроорганизмов:
| 
 Культуральные | 
 Морфологические | 
| 1. Форма колонии – округлая 2. Размер – 0,3-0,4 см 3. Цвет – зеленый 4. Блеск – матовый 5. Поверхность – шероховатая 6.  Структура – неоднородная       | 1.Форма клетки – собраны в кисти 2. Характер расположения клеток – хаотично | 
                              
                                                        
Фото 16. Penicillium sp. Фото 17. Trichoderma sp.
Увеличение: х1600 Увеличение: х1600
Фото 18. Среда Гетчинсона
(Trichoderma sp.)
                              
Фото 19 и 20. Среда Гетчинсона (Trichoderma sp.) 2-е разведение
Фото 21 и 22. Среда Гетчинсона (Trichoderma sp.) 3-е разведение
Качественная оценка микроорганизмов на среде Эшби методом обрастания комочков почвы
| Общее число комочков | Количество обросших комочков | % обросших комочков от общего числа | 
| 30 | 21 | 70% | 
Фото 23. Среда Эшби (Azotobacter ch.)
Цвет колонии – коричневый
Консистенция – слизистая
На среде обнаружен Azotobacter choroococcum
Рис. 4 Azotobacter choroococcum
Увеличение: х1600
Численность 
микроорганизмов различных 
| 
 Общее кол-во микроорганизмов на МПА (КОЕ/г) | 
 Общее кол-во актиномицетов (КОЕ/г) | 
 Общее кол-во микроскопических грибов (КОЕ/г) | Кол-во микро- организмов, разлагающих Клетчатку (КОЕ/г) | 
 Плотность азотобактера в почве, в % | 
| 
 6358491 | 
 136793 | 
 249246 | 
 179246 | 
 70% | 
Заключение
В полученном образце тепличного грунта в ходе микробиологического анализа были обнаружены микроорганизмы рода Bacillus, как доминирующий вид, играющий одну из главных ролей в процессе азотфиксации. Его органические соединения позволяю судить о хорошем состоянии почвы. Так же были обнаружены различные формы микроскопических грибов (Penicillium sp. и Aspergillus sp.), что свидетельствует об интенсивном разложении азотных органических соединений и медленном разложении клетчатки. Актиномицеты присутствуют в меньшем количестве по сравнению с другими обнаруженными микроорганизмами, большое наличие актиномицетов в почве говорит о большом процентном содержании гумуса, и, как следствие, о повышенном плодородии почвы. Также в исследуемом образце был найден Azotobacter choroococcum, а значит процесс азотфиксации протекает достаточно интенсивно.
Таким образом, данный тепличный грунт прекрасно подходит для получения большого урожая овощных культур высокого качества.
Список используемой литературы